Тест на МДМА (экстази)

Анализ биологических образцов на наличие метаболитов МДМА проводится с целью установления факта наркомании. Главная задача при исследовании заключается в идентификации наркотического вещества. В зависимости от направленности анализа химико – токсикологическое исследование может проводиться в несколько этапов.

Виды наркодиагностики

Структурная модификация амфетамина в теневых лабораториях привела к широкому распространению новых синтетических наркотиков группы фенилэтиламинов. Добавление заместителей в бензольное кольцо и боковую алкиламинную цепь позволило синтезировать новые психотропные вещества. Широкое распространение получили: МДМА, МДА.

Экстази метаболизируется в организме с разной скоростью – на это влияет различная активность стереоизомеров. МДМА обладает низкой молекулярной массой, поэтому всасываясь в тонком кишечнике, легко проникает через клеточные мембраны. После процесса метаболизма психотропное вещество медленно экскретируется из организма.

МДМА неравномерно аккумулируется в тканях. Наибольшая концентрация метаболитов находится в печени и ЦНС. Поэтому чаще для наркодиагностики исследуют образец мочи, поскольку основное разрушение токсикантов осуществляют печеночные ферменты.

Химико – токсикологический анализ биологических образцов позволяет обнаружить метаболиты экстази:

• МДА (тенамфетамин);
• 4-гидрокси-3-метокси-метамфетамин;
• Ванилилминдальная кислота;
• α – метилодопамин;
• 3,4-метилендиоксифенилацетон.

От частоты потребления наркотика и его дозировки зависит максимальная концентрация токсинов в крови.

Основные пути метаболизма экстази в организме:

• N – деметилирование;
• Окислительное деалкилирование;
• Дезаминирование;
• Присоединение остатков – метильный, сульфатный, глюкуроновый.

Наркодиагностика включает в себя два основных направления:

• Судебноправовая – биологические образцы исследуют для подтверждения факта наркомании, степени интоксикации и определения количества принятого наркотика;
• Клиническая – идентификация метаболитов МДМА требуется для диагностических и терапевтических целей.

При клинической направленности достаточно результата иммунохимического анализа (экспресс - тест). Но для инструментального метода исследования экспресс - тестирование считается предварительным результатом.

При судебно-правовой направленности вещество анализируется как минимум двумя методами, причем один из этих методов используется для предварительного исследования, а другой – для подтверждающего исследования.

Химико – токсикологический анализ на группу веществ, изолируемых экстракцией и сорбцией /В. П. Евстигнеева, И.В. Шкутина, Т.А Брежнева, А.И. Сливкин - Учебно-методическое пособие для студентов. Воронеж, 2004. – 10 – 32 с.

Отрицательный результат, полученный на первом этапе химико – токсикологического исследования (иммунохимический анализ) имеет важную диагностическую значимость. Второй этап исследований (инструментальный) может, не проводится, поскольку отрицательный тест свидетельствует об отсутствии метаболитов МДМА. Но при сомнительных результатах или признаках наркотической интоксикации, исследования продолжают при помощи хромато – масс – спектрометрии.

Предварительное тестирование

Экспресс - тесты предназначены для одноэтапного скрининга. Иммунохроматографический анализ мочи позволяет быстро получить результат с высокой достоверностью.

Преимущества экспресс - тестирования:

• Высокая чувствительность;
• Объективность оценки;
• Скорость выполнения тестирования;
• Доступность метода;
• Простота диагностики.

ИХА – полоски поглощают биологический образец (моча или слюна) за счет абсорбирующего слоя. Диагностика проводится по принципу тонкослойной хроматографии. То есть если в образце присутствуют метаболиты МДМА, то они вступают в реакцию антиген – антитело с моноклональными антителами. В тестовой зоне появляется результат реакции – цветная индикация.

Несмотря на преимущества ИХА – метода, существуют и недостатки:

• Получение ложноположительного результата – возникает при перекрестном реагировании веществ;
• Отсутствие индивидуального различия соединений внутри группы.

Если в исследуемом образце отсутствуют метаболиты экстази, то в тестовой зоне появляются две индикаторные линии, что свидетельствует об отрицательном результате.

Тест покажет отрицательный результат на наличие психотропного вещества, даже если метаболиты присутствуют, но пороговое значение ниже установленного. Это, несомненно, еще один минус иммунохроматографического исследования.

На практике это позволяет говорить, что результат анализа является отрицательным, даже если вещество обнаружено, но находится ниже уровня порогового значения. Положительный результат исследования может быть использован для подтверждения факта того, что человек подвергался воздействию вещества. Однако отрицательный результат не отрицает возможности использования или воздействия на человека психоактивных веществ. Уровень пороговых значений при инструментальной диагностике индивидуально установлен для каждого метода анализа и объектов исследования – моча, кровь, слюна, волосы или иные объекты.

Необходимость введения методов количественной оценки психоактивных веществ в биологических образцах / А.С. Силантьев, Е.В. Гребенкина, А.Е. Носырев – Токсикологические аспекты наркологии. – 138 – 140 с.

От порогового значения экспресс - теста зависит результат заключения. Поэтому инструментальные методы диагностики считаются наиболее достоверными.

Бренды и производители экспресс - тестов для определения метаболитов МДМА в биологических образцах:

• Планшетный экспресс - тест для определения лекарственных веществ/экстази/ для мочи – компания Teco Diagnostics (Калифорния);
• ИХА – МДМА – Фактор – компания Фактор – Мед (Россия). Погружные тест – полоски для выявления метаболитов в моче;
• ИммуноХром – НАРКО – Экспресс на экстази – компания Фактор – Мед (Россия). Тест – полоски для выявления метаболитов МДМА в порошках, таблетках, смывах с рук, в растворах и других объектах исследования;
• Будьте уверены – компания Мед – Экспресс – Диагностика (Россия). Экспресс - тест на определение МДМА в моче;
• EVANCARE Коллоидное золото MDMA – компания Evancare Medical (Китай). Тест – полоски для определения метаболитов в слюне или моче.

Результаты диагностики считаются недействительными, если через 5 минут в тестовой зоне не проявляются индикаторные линии. Каждая тест – полоска предназначена для однократного использования. Для получения достоверного результата необходимо провести диагностику не позднее двух часов после вскрытия упаковки.

Подтверждающие исследования

Второй этап химико – токсикологического анализа – хроматографическое исследование биологического образца. Самым надежным методом идентификации метаболитов считается газовая хроматография с масс – селективным детектированием и процедура жидкость – жидкостной экстракции.

Дериватизация с использованием пентафторпропионового ангидрида позволяет идентифицировать производные амфетамина, метамфетамина, МДА, МДМА в режиме сканирования индивидуальных ионов в газовом хроматографе с масс – селективным детектором.

Количественное определение амфетамина, метамфетамина, МДА, МДМА, МДЕА,MDBD в биожидкостях методом газовой хроматографии с масс – селективным детектором / Н. А. Крупина, М. В. Марченко, Р. Р. Краснова – Журнал Судебная медицина. – том 1 № 2. – 2015. – 78 - 79 с.

Для количественного анализа МДМА в моче в качестве калибратора используют образец мочи с различными значениями каждого производного группы психотропного вещества.

Газовая хроматография позволяет исследовать не только жидкие субстанции. Объекты, подвергаемые исследованию, делят на различные группы:

• Биологический материал – кровь, моча, волосы, ногти, внутренние органы, промывные воды или смывы;
• Твердые субстанции – таблетки, порошки, капсулы;
• Растворы.

Для исключения факта фальсификации образцов в основу газовой хроматографии включен скрининговый метод. Частные методики определения при ненаправленном анализе позволяют определить неизвестное вещество.

К подтверждающим методам исследования относятся: ГХ/МС, ГЖХ, ВЭЖХ. Результаты анализа на втором этапе должны быть выше или равными по чувствительности с иммунохимическими методами. Но специфичность исследования должна быть выше предварительного тестирования – это позволяет исключить ложноположительный результат.

Преимущества хроматографических методов исследования:

• Достоверность;
• Высокая чувствительность;
• Количественная оценка;
• Исследование различных субстанций;
• Определение наркотического вещества внутри группы;
• Определение неизвестного синтетического соединения.

Полученные результаты позволяют подтвердить или опровергнуть факт наркомании. Сопоставление концентрации метаболитов МДМА в биологическом образце помогает установить «стаж» наркомании. При хронической зависимости концентрация метаболитов высокая. На разовое употребление указывает превышение концентрации наркотического вещества над концентрацией метаболита.

Метаболизм МДМА в жидкостях происходит намного быстрее, в отличие от волос или ногтевой пластины. Поэтому химико – токсикологическое исследование данных образцов позволяет установить факт и «стаж» наркомании независимо от скорости метаболизма.

Перед селективным анализом проводится пробоподготовка образцов – очищение от примесей или загрязнений. Примеси содержат дополнительную информацию, поэтому также подлежат исследованию.

Подготовка био – образцов для проведения химико – токсикологического анализа:

• Моча – концентрация метаболитов зависит от pH, поэтому образец подвергается преданалитической обработке (упаривание, сорбция, хроматографическое разделение, концентрирование);
• Кровь – на концентрацию метаболитов влияют биохимические изменения. Кровь или плазма подлежит экстракции и антикоагуляции;
• Слюна – для снижения активности ферментов, которые разрушают метаболиты, образец центрифугируют и замораживают;
• Волосы – образцы исследуют в несколько этапов. После предварительного анализа поверхности образец очищается и подвергается экстракции растворителем.

Метод экстракции широко используется для изолирования токсических веществ из биологических образцов. Но жидкость – жидкостная экстракция является самым распространенным способом выделения психотропных веществ из образцов.

Можно ли обмануть химико – токсикологическое исследование

Обмануть химико – токсикологический анализ невозможно, если концентрация метаболитов находится в пределах порогового значения. При исследовании волос или ногтей хроматографический анализ показывает положительный результат даже спустя 12 месяцев после последнего приема.

Заключение

• Инструментальные методы исследования имеют высокую достоверность.
• Иммунохроматографический анализ устанавливает только факт употребления экстази.
• Исследование волос и ногтей при помощи газожидкостной хроматографии позволяет определить единичное или хроническое употребление.
• При инструментальных методах исследования исключено получение ложноположительного результата.
• Обмануть наркодиагностику невозможно.

1. Химико – токсикологический анализ на группу веществ, изолируемых экстракцией и сорбцией /В. П. Евстигнеева, И.В. Шкутина, Т.А Брежнева, А.И. Сливкин - Учебно-методическое пособие для студентов. Воронеж, 2004. – 10 – 32 с.
2. Необходимость введения методов количественной оценки психоактивных веществ в биологических образцах / А.С. Силантьев, Е.В. Гребенкина, А.Е. Носырев – Токсикологические аспекты наркологии. – 138 – 140 с.
3. Количественное определение амфетамина, метамфетамина, МДА, МДМА, МДЕА,MDBD в биожидкостях методом газовой хроматографии с масс – селективным детектором / Н. А. Крупина, М. В. Марченко, Р. Р. Краснова – Журнал Судебная медицина. – том 1 № 2. – 2015. – 78 - 79 с.
4. Правила проведения химико-токсикологических исследований на предмет наличия в организме человека наркотических средств, психотропных и иных токсических веществ (их метаболитов) при проведении медицинских осмотров и медицинских освидетельствований отдельных категорий граждан /Б.Н. Изотов, А. Г. Кочетов. – М. – 2015. – 13 – 14 с.
5. Химико – токсикологический анализ производных амфетамина / Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский – Кафедра фармацевтической и токсикологической химии.: Иркутск, 2016. – 19 – 23 с.